问题补充:
下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因,ampR表示氨苄青霉素抗性基因,BamHⅠ、Hind Ⅲ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。
据图回答下面的问题。
(1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体,需用限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含的培养基上进行。
(2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是(填字母代号)。
A.启动子 B.tetR
C.复制原点 D.ampR
(3)过程①可采用的操作方法是(填字母代号)。
A.农杆菌转化 B.大肠杆菌转化
C.显微注射 D.细胞融合
(4)为检测人乳铁蛋白是否成功表达,可采用(填字母代号)技术。
A.核酸分子杂交 B.基因序列分析
C.抗原—抗体杂交 D.PCRHindⅢ和BamH Ⅰ氨苄青霉素(2)A (3)C(4)C
答案:
(答案→)HindⅢ和BamH Ⅰ氨苄青霉素(2)A (3)C(4)C
解析:HindⅢ和BamH Ⅰ位于目的基因的两侧,基因载体上有此两个酶切位点,筛选含有重组载体的大肠杆菌要利用其标记基因,所以应该放在氨苄青霉素的培养基上进行。启动子能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达。把基因表达载体导入动物细胞用显微注射的方法,为检测人乳铁蛋白是否成功表达,可采用抗原—抗体杂交的方法。
下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因 ampR表示氨苄青霉素抗性基因 BamHⅠ Hind Ⅲ SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点