使 用 说 明(96T/48T)
作者: 江彬
Tel : 1991-4747-194
[原理]
本试剂盒采用纯化RF抗原预包被板ELISA原理,并配以酶标记抗人IgA单克隆抗体作为标记物。加入底物TMB显色后终止反应,在450nm波长测各孔O.D值,O.D值的大小与待检抗体含量成正比。试剂的特异性高、灵敏度好、稳定性极大地提高是本试剂含有的独特优点。
[用途]
本试剂盒用于定性检测人血清/血浆/乳汁等标本中的RF因子IgA抗体。
[试剂盒组成]
1、抗原预包被反应板 1块(8X12/4X12)
2、阴性对照1瓶(直接使用)
3、阳性对照1瓶(直接使用)
4、标本稀释液1瓶(20/10 ml,直接使用)
5、酶结合物1瓶(10/5ml,直接使用)
6、30X浓缩洗液1瓶(20/10ml,加蒸馏水1:30稀释使用)
7、显示剂A、B液各1瓶(5/2.5ml)
8、终止液(2M H2SO4) 1瓶(5/2.5ml)
9、说明书1份
[操作步骤]
1. 将试剂盒平衡至室温后取出反应板拆封。
2. 加样:每孔加标本稀释液200ul,再分别加待检标本10ul(1:21),设阴阳性对照(100ul各一孔)于反应板中,设空白对照一孔(加100ul标本稀释液),轻拍混匀。
3. 37℃温育30分钟。甩去孔内液体,用洗涤液连续洗板3次每次在吸水纸上拍干。
4. 加酶结合物:每孔2滴(或100ul),混匀后置37℃温育30分钟。同上法洗涤3次并拍干。
5. 显色:每孔加显色剂A、B各1滴(或50ul),轻拍混匀(或震荡器混匀)后置37℃10分钟。
[结果判断]
1. 目测:在白色背景下观察各孔显色情况,兰色者为阳性,无色者为阴性。
2. 酶标仪测定:每孔加终止液1滴(或50ul),混匀后在450nm下测定各孔O.D值。
①P/N=标本O.D值/阴性对照O.D值。
②P/N≥2.1为阳性;
③P/N∠2.1为阴性。
④阴性对照小于0.10时以0.10计。
⑤肉眼可见兰色,但酶标仪测出OD值小于0.21者,为可疑标本,应择日重复。
[注意事项]
1.微孔板须密封防潮,从冷藏环境中取出时,应置室温平衡至潮气尽干后方可开启使用,余者封存置2-8℃。
2.滴加试剂前应将液体翻转数次混匀,滴加时保持瓶身垂直。
3.洗涤时每孔均须加满,防止孔内有游离酶不能洗净。
4.试剂置2-8℃存放,不能冻结,有效期10个月。
5.避免用溶血、混浊或脂血标本。
6.最好用新鲜标本,如需保存,可于2-8℃冷藏48小时或-20℃冻存4周(样本应避光)